2017/02/15
色譜柱是高效液相色譜儀主要的部件,柱效的好壞直接影響目標化合物的分析和檢測。但在高效液相色譜分析中,容易發生柱堵塞引起系統壓力過高、柱效低引起峰拖尾和變寬、柱污染和損壞導致鬼峰等問題,出現這些問題的內在原因有硅羥基的死吸附、重金屬的存在、碳流失、緩沖液中鹽的析出和色譜柱變干等。
一、硅羥基的死吸附:
由于色譜柱的基材硅膠粒子表面存在硅膠羥基,樣品組分既在流動相與固定相之間進行分配,又在流動相與硅羥基之間進行分配,即存在雙分配效應。樣品組分被硅羥基吸附稱為死吸附或非特異性吸附。當硅羥基對樣品組分的吸附趨近于飽和時,柱效下降,會導致峰拖尾和變寬。
二、重金屬的存在:
色譜柱的基材硅膠粒子無論純度多高,無論怎樣處理,都會有重金屬以金屬氧化物的形式殘存在硅膠粒子表面。這些金屬氧化物很容易與其它化合物形成螯合物,使其被氧化,產生不對稱峰或拖尾峰。
三、碳流失:
固定相長期使用后,會有部分碳鏈被流動相洗脫下來,隨流動相一起流出色譜柱,造成碳流失。
四、緩沖液中鹽的析出:
色譜分析時,有時流動相中會含有緩沖鹽溶液。分析結束后,如果沒先用含一定配比的水相流動相沖洗,而直接用純有機相沖洗,瞬間柱子的微環境中有機相高,水相低。這時,流動相中的緩沖鹽溶液極易析出鹽,將柱子堵塞,使柱壓升高,柱效下降。
五、色譜柱變干:
如果色譜柱保存不當,使色譜柱中的保存液全部揮發掉,柱子內部變干,會損傷色譜柱,影響分離效果。
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